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產(chǎn)品名稱:線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC2170

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒
產(chǎn)品說明: CA 是線粒體三羧酸循環(huán)的第1個中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰 CoA 與草酰乙酸合成,其 含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標之一。

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BC2170線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒的詳細資料:

線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒

 紫外分光光度法 
注意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。

貨號:BC2170 
規(guī)格:25T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容: 
酸性提取液:液體 25 mL×1 瓶,4℃保存。 
堿性提取液:液體 25 mL×1 瓶,4℃保存。 
試劑一:液體 7.5mL×1 瓶,4℃保存。 
試劑二:液體 2.5mL×1 瓶,4℃保存。 
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 7.5mL 蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保 存。
標準品:液體 1mL×1 支,10µmol/mL 檸檬酸標準液,4℃保存。

產(chǎn)品說明: CA 是線粒體三羧酸循環(huán)的第1個中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰 CoA 與草酰乙酸合成,其 含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標之一。 CA 在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進一步與苯 肼反應,生成相應的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在 330nm 處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可 反應出 CA 的含量。

自備儀器和用品: 紫外分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL 石英比色皿、研缽和蒸餾水。

操作步驟: 
一、線粒體中檸檬酸提?。?nbsp;
1. 稱約 0.05-0.1g 組織(建議稱 0.1g 樣本),加入 0.5mL 酸性提取液,冰上充分研磨,600g/min 4℃ 離心 5min,取上清另一 EP 管中,11000g/min 4℃離心 10min,棄上清(取 300µL 該上清液和 300µL 堿性提取液中和后可用于細胞質(zhì) CA 含量測定);
沉淀即線粒體,向沉淀中加入 0.5mL 酸 性提取液,充分懸浮溶解,超聲波破碎(功率 20%,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復 30 次),取此 溶液 300µL 和 300µL 堿性提取液中和,混勻,置冰上待測(不可用于蛋白質(zhì)含量測定)。

相關文獻:

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
 

線粒體檸檬酸(MCA)含量檢測試劑盒

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